淋巴瘤Seq-MRD®检测介绍| 基于ct-DNA Ig/TCR NGS技术检测MRD

一、淋巴瘤是什么?

淋巴瘤是一种恶性肿瘤,由淋巴细胞异常增殖引起。

图1:显微镜下的淋巴瘤

 

在中国,淋巴瘤发病率为4.75/10万。淋巴瘤根据淋巴细胞类型和病变的部位分为不同亚型。淋巴瘤有80种左右的分类,大体可分为霍奇金淋巴瘤(HL)(占10%)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)(占90%)两大类。非霍奇金淋巴瘤主要包括B细胞淋巴瘤(约占70%)和T/NK细胞淋巴瘤(约占20%) 。

 

B细胞淋巴瘤是指淋巴细胞中的B细胞发生恶性变异,形成肿瘤。B细胞淋巴瘤包括弥漫大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、小淋巴细胞淋巴瘤等不同亚型,具体分布如下图所示。

图2:B细胞淋巴瘤病型分布图

T细胞淋巴瘤是指淋巴细胞中的T细胞发生恶性变异,从而形成肿瘤。

T细胞淋巴瘤可以根据发病部位分为:皮肤T细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤、成人T细胞白血病淋巴瘤等不同亚型,具体分布如下图所示。

图3:T细胞淋巴瘤病型分布图

二、关于ctDNA

ctDNA(循环肿瘤DNA)是指肿瘤细胞释放进入血液循环中的DNA分子。

 

图4:ctDNA图解

 

由于肿瘤细胞在不断分裂生长的过程中,会释放一部分DNA进入血液循环中,这些DNA分子携带了肿瘤细胞的遗传信息,可以被检测到。

 

因此,ctDNA可以作为肿瘤生物标志物进行监测,用于肿瘤的早期筛查、诊断、治疗效果评估和复发监测等方面。

 

相比于传统的肿瘤检测方法(如组织活检和影像学检查等),ctDNA具有较多创新性的优点,下已列出

_

ctDNA优点:

_

非侵入性:不需要切除肿瘤组织或进行穿刺等操作,减少了对患者身体的创伤和疼痛

_

重复性:可以反复进行检测,不受肿瘤部位、大小、深度等因素的影响

_

灵敏度高:可以检测到肿瘤微小变化,比如微小的残留病灶和微转移等

特异性强:ctDNA是来自肿瘤细胞的DNA,因此可以避免误诊或漏诊

 

随着科技的发展,新型的ctDNA检测方法层出不穷,其中就包括有数字PCR、下一代测序NGS和血清甲基化等。

 

在众多方法中,NGS脱颖而出,进一步为检测多种基因的突变和Ig/TCR重排等生物标志物的过程提高了检测灵敏度和特异性

 

临床上,检测ctDNA已然成为一种新兴的技术目前已经被应用于多种癌症的筛查、诊断、疾病监测和治疗等方面。

三、介绍淋巴瘤中Ig/TCR重排MRD检测原理

淋巴瘤虽属于具有组织结构的实体肿瘤,但与其他实体肿瘤相比,具有更易浸润骨髓、肿瘤细胞更易进入外周血循环的特点。

淋巴细胞的基本特征之一,每种B或T 细胞淋巴瘤都有特征性的免疫球蛋白(IG)或T细胞受体(TCR)重排序列(下图)。正常淋巴细胞未受任何刺激情况下,其基因重排是随机的,故细胞表现为多家族和多克隆性,具有发挥各种细胞免疫作用的潜能。

图5:TCR基因重组

图6:BCR基因重组

而在淋巴细胞白血病或淋巴瘤发生过程中,淋巴细胞在某一个或几个特定的TCR或Ig基因性重排的细胞中发生转化,导致TCR或Ig基因单克隆性表达,使淋巴细胞呈现为克隆性增殖

 

从而在淋巴结,外周血或者骨髓细胞中出现1个或2个主要淋巴细胞克隆,呈单克隆性,TCR和Ig基因家族的单克隆重排是淋巴瘤细胞群的重要特征。

 

基于此原理,IG/TCR的克隆性重排检测能够在一定程度上指导对B/T细胞克隆性的判断。早期已有研究发现在B细胞肿瘤的血浆或血清DNA 中能检测到IG克隆性重排。

四、临床检测淋巴瘤MRD方法

淋巴瘤MRD的常规检测方法主要包括影像学检查(如CT、PET-CT等)和组织活检。这些方法虽然在一定程度上可以检测肿瘤的存在和发展情况,但也存在一定局限,比如:

[Ⅰ]影像学检查无法准确区分肿瘤细胞和正常细胞,无法检测到微小的残留病灶和微转移等。

[Ⅱ]组织活检需要切除肿瘤组织或进行穿刺等操作,对患者身体造成一定的创伤和疼痛。

基于 ctDNA 的方在淋巴瘤的诊断和治疗中具有很大的潜力,ctDNA 检测可以作为一种非侵入性的诊断方法,能够对患者是否患有淋巴瘤进行快速、准确的检测。

目前基于ctDNA的MRD检测方法主要有基因突变位点的检测Ig/TCR的检测

基于ctDNA的突变检测虽然临床可根据检测结果进行对应用药的指导,但在MRD检测上也存在一些劣势之处,比如:

[Ⅰ]突变检测结果受到许多因素的影响,如ctDNA浓度、肿瘤细胞的裂解情况等,可能会导致假阳性或假阴性结果。

[Ⅱ]基于ctDNA的突变检测方法无法确定突变来自哪些细胞,可能会掩盖真正的肿瘤细胞,从而导致漏诊。

[Ⅲ]价格较高

相比之下,基于ctDNA的Seq-MRD®方法具有以下优势和临床应用功能特点:

[Ⅰ]灵敏度高:可以检测到极低浓度的ctDNA,从而检测到微小的残留病灶和微转移等

[Ⅱ]特异性强基于Ig/TCR重排的MRD检测方法可以确定突变来自肿瘤细胞,减少了假阳性或假阴性的可能性

[Ⅲ]重复性好:可以反复进行检测,随时监测疾病进展情况

[Ⅳ]可监测治疗效果:基于Seq-MRD®的方法可以及时监测MRD水平,评估治疗效果,帮助医生进行个性化治疗

[Ⅵ]指导分层治疗:根据诱导缓解治疗早期及巩固治疗开始前MRD水平对患者进行危险度分层,指导分层治疗。

总的来说,基于ctDNA的Seq-MRD®方法具有较高的检测灵敏度和特异性,非常适用于淋巴瘤的MRD检测。

五、基于ctDNA的Seq-MRD®方法流程

六、样本运输要求

关于艾沐蒽

  杭州艾沐蒽生物科技有限公司由美国芝加哥大学科研团队回国创办,是一家专注于通过解码适应性免疫系统来改变疾病的诊断和治疗,并致力于推进免疫驱动医学领域发展的国家高新技术企业。

  艾沐蒽站在适应性免疫系统研究的前沿,自主研发的免疫医学平台可揭示和翻译适应性免疫系统的遗传密码,并能应用于癌症、自身免疫性疾病、传染性疾病等免疫介导性疾病的诊断、监测和治疗中。

ImmunoDiagnostics | ImmunoMonitoring

免疫诊断 | 免疫监控

专注于免疫组高通量测序

长按关注艾沐蒽生物

 ImmuHub | Seq-MRD | Seq-SHM 

Immun-Traq| Immun-Cheq

Web:www.immuquad.com

Email:Contact@immuquad.com

Tel:0571-81061561

Address:杭州市上城区石桥路196号浙江省农创园

4号楼1层