在B-ALL的NGS MRD检测中，IG重链（IGH）价值更大，更具有预后意义，这一点已被多篇文献所证实，也逐渐成为行业内专家共识。轻链IGL/IGK/IGKDE的独特性不如IGH，是相对不可靠的预后标志物，但如何区分轻链中有价值的癌细胞克隆与背景克隆，目前尚无定论。
近日艾沐蒽联合浙江大学医学院附属儿童医院血液科徐晓军教授团队在annals of laboratory medicine杂志发表了题为“Non-specific Clones Hamper the Reliability of Ig Light Chain Gene Rearrangements in Next-Generation Sequencing-Based Measurable Residual Disease Monitoring in Pediatric B-Cell ALL: A Single-Center Cohort Study”的文章，该研究采用的是艾沐蒽的Seq-MRD®技术，系统分析了IGK/IGKDE重排中非白血病特异性克隆的特征，提出D-J之间的N区长度、在人群中的分布概率等因素有助于过滤非特异性克隆。这将提高基于IGK重排监测MRD的可靠性，对于优化NGS MRD监测和优化后续治疗决策至关重要。
该文章是艾沐蒽Seq-MRD®平台发表的第5篇学术成果，未来艾沐蒽将继续在血液肿瘤NGS MRD检测领域深耕不辍、持续探索，以前沿技术赋能精准诊疗，为血液肿瘤患者的康复之路注入更坚实的力量！
该研究纳入540例儿童B-ALL患者，506例（93.7%）患者初诊时鉴定到至少1个可追踪克隆。在诱导治疗结束（EOI）时和巩固治疗结束（EOC）时采集骨髓样本进行NGS MRD追踪检测，巩固治疗后MRD监测每2-3个月进行一次，直至转阴或最长12个月。主要终点为无复发生存期（RFS），次要终点包括总生存期（OS）和累计复发发生率。主要预测因子是位点特异性NGS MRD水平及预设时间点的MRD持续模式，尤其针对IGH与IGK/IGKDE克隆型的比较。
持续性IGH MRD可预测复发，持续性IGK/IGKDE与复发无关
将可追踪克隆在EOC时分类为“清除”组与“持续”组。IGH清除组和持续组的5年RFS率分别为96%和77.5%（P＜0.001；图1A）；而IGK清除组和持续组的5年RFS率分别为93.4%和100%（图1B）。这表明持续性IGH MRD可作为明确的高风险标志，而IGK不是。
将患者分为持续完全缓解（CCR）组和复发组。在CCR组中，IGH克隆数量在前三个月急剧下降至基线的5.3%，6个月及12个月时进一步减少至仅剩1个（0.1%）（图1C）。IGK和IGKDE克隆在前3个月内也急剧下降，但随后清除率趋于稳定，至12个月时，仍有12.4%的IGK克隆和20.2%的IGKDE克隆可检测到，且在6至12个月期间出现轻微反弹（图1D）。这些结果表明存在治疗耐药的非白血病克隆，而非真正的MRD。
对同时具有IGH和IGK两种重排的患者在诊断时的IGH和IGK克隆频率进行了配对分析。分布差异显著：非特异性IGK克隆未与匹配的IGH克隆形成对应关系，这凸显了IGH和IGK需要分别进行MRD分析的必要性（图1E）。
图1
将每个可追踪克隆序列与健康人IG数据库（艾沐蒽自建）进行比对，克隆型按照在健康群体中的匹配概率分为三组（≤1%、1%–10%和>10%）。仅有2.4%的IGH序列匹配概率超过1%，仅有一个IGH序列超过10%（图2A）。相比之下，46.5%的IGK和46.1%的IGKDE克隆型在健康IG数据库中匹配概率超过1%。
然后作者研究了CCR患者在12个月时清除和持续阳性克隆在健康数据库中匹配的概率。持续阳性克隆中，所有IGH均未与健康数据库匹配，而88.5%的IGK克隆和94.1%的IGKDE克隆匹配概率＞10%（图2B）。在12个月时已清除的克隆中，IGK、IGKDE与健康数据库匹配的概率也远高于IGH克隆（图2C）。在19例EOI和EOC均IGK阳性的患者中，11例患者的IGK序列与健康数据库匹配的概率＞10%（图2D）。
以上说明相当一部分的IGK/IGKDE可追踪克隆在健康人中也广泛存在，而非白血病特异性克隆。
图2
作者将可追踪的克隆分为“特异性”和“非特异性”两类：对于维持CCR≥2年的患者，若克隆在化疗后3个月内消失且其与健康数据库的匹配概率≤1%，则标记为特异性克隆；若克隆持续≥12个月且与健康数据库的匹配概率>10%，则判定为非特异性克隆。任何在清除后复发时重新出现的克隆同样被归类为特异性克隆。
应用该标准，共鉴定出特异性克隆IGH有699个、IGK 124个、IGKDE 47个，未发现非特异性IGH克隆，有24个IGK克隆和16个 IGKDE克隆符合非特异性克隆定义。
然后作者比较了特异性与非特异性IGK克隆的初诊克隆频率和序列结构。初诊时的克隆频率无显著差异（图3A），CDR3长度虽然存在显著差异，但仅凭CDR3长度无法区分IGK白血病克隆与背景克隆：非特异性克隆主要聚集在9-13个氨基酸区域，但是也有62.4%的特异性克隆是在该区域内（图3B）。
既往有研究发现连接V区与J区的N区长度在白血病克隆与非白血病克隆中差异很大，因此作者也对此进行了分析。发现非特异性克隆的N区长度为0-4个核苷酸，而特异性克隆的N区长度无固定值，81.5%的克隆具有≥4个核苷酸（图3C）。ROC曲线分析表明，利用N区长度预测特异性克隆具有高准确性（图3D）。对于EOI和EOC时持续阳性的IGK克隆，基于N区长度＜4的规则可过滤掉63.2%的克隆。
图3
如图4A所示，初诊时45.9%的IGK克隆的N区长度＜4个核苷酸，与健康数据库匹配概率＞10%的IGK克隆主要呈现0-3个核苷酸的N区长度（85.4%），而匹配概率≤10%的克隆中仅有31.4%的N区长度＜4个核苷酸（P
采用N区长度＜4个核苷酸为阈值进行过滤后，有11例患者不再存在可追踪克隆（图4C-D），用于MRD监测的IGK克隆总数从278个降至155个，CCR患者在12个月随访时IGK持续克隆的比例从12.4%显著下降至2.5%（图4E）。此外，应用新标准后， EOI+EOC+、EOI–EOC–和EOI/EOC+组的IGK克隆数量均降低，同时保留了EOI–EOC–组与EOI/EOC+组之间的预后差异（图4F）。
图4
高灵敏度的NGS MRD检测推动B-ALL治疗进入“精准化时代”，但其临床价值依赖于严格、准确的结果解读。本研究再次证实了IGH的预后价值优于IGK/IGKDE，进一步探索发现一些IGK/IGKDE在健康群体中也很常见，这些非白血病特异性克隆削弱了轻链在MRD监测中的价值。通过V-J之间的N区长度、在健康人中的分布概率等特征有助于识别和过滤非特异性克隆。该发现对于准确利用NGS MRD结果指导临床治疗具有重要意义，进一步提升了MRD监测的精准度，避免“假阳性”导致的过度治疗。
文章来源：
Chen H, Miao J, Fan L, et al. Non-specific Clones Hamper the Reliability of Ig Light Chain Gene Rearrangements in Next-Generation Sequencing-Based Measurable Residual Disease Monitoring in Pediatric B-Cell ALL: A Single-Center Cohort Study. Ann Lab Med. Published online February 12, 2026.
艾沐蒽专注于免疫组二代测序领域多年，是于2016年全国首家推出血液肿瘤NGS MRD检测产品Seq-MRD®的公司。Seq-MRD®适用于B/T系白血病、B/T系淋巴瘤、多发性骨髓瘤，能够帮助临床医生预测长期疗效、评估治疗效果、监测缓解状态以及监测早期复发。经过多年的积累和发展，Seq-MRD®在临床检测和科学研究上均取得不少成果，并获得国际市场认可。
艾沐蒽创始人参与了中华医学会儿科学分会血液学组等权威机构联合发布的《儿童白血病微小残留病监测与临床应用指南（2026）》的撰写，为NGS MRD指导临床治疗的标准化与规范化提供重要指导意见。
Seq-MRD®获得欧盟CE资质（注册号：DE/CA20/01-IVD-Luxuslebenswelt-190/22），获批的是人淋巴B细胞微小残留病基因检测试剂盒（可逆末端终止测序法）。
艾沐蒽推出的Seq-MRD®血液癌症MRD检测是最早批实现商业化的产品，自2016年研发专利技术至今，艾沐蒽Seq-MRD®已经获得3项国家发明专利：
[1]“一种应用于高通量测序检测T细胞白血病微小残留病的引物组合及试剂盒”（专 利 号: 2016 11204857.0，授权公告号:CN 106957906 B）
[2]“一种检测微小残留病MRD的试剂盒”（专 利 号: 2018 1 1550133.0，授权公告号: CN 109652518 B）
[3]“一种检测微小残留病MRD的方法”（专 利 号: 2018 1 1549203.0，授权公告号: CN 109680062 B）
艾沐蒽拥有自主研发的生信分析平台，艾沐蒽Seq-MRD® 已经获得3项国家计算机软件著作：
[1]“免疫组库MRD检测自动化报告系统[简称ImmuReport] V1.0”（登记号：2019SR0916207）
[2]“Seq-MRD检测自动化分析系统（DiscTermite）[简称：DiscTermite]0.4.6“（登记号：2019SR1131517）
[3]“基于免疫组库二代测序的微小残留病（MRD）检测数据处理系统”（登记号：2020SR0507594）
1、艾沐蒽联合浙大附一黄河教授完成的《新型CAR-T细胞研发及其治疗恶性血液病临床转化创新体系建立》获2023年度浙江省科学技术进步奖一等奖。Seq-MRD®在该技术的创新与应用中起到了关键性作用。
2、艾沐蒽申报的“免疫组TCR/Ig高通量测序技术/血液肿瘤微小残留病（MRD）检测/Seq-MRD®”因其创新性、前沿性、市场实用性荣获“2022年度CCTB中国肿瘤标志物产业创新大会创新技术/产品评选”项目二等奖。
2023年获批了【全血/骨髓基因组DNA提取试剂盒】（离心吸附柱法）备案编号：浙杭械备20230798 ，试剂盒分别适用于人外周血、骨髓样本的核酸的提取。
Seq-MRD®发表相关文献
1、Huang Y, Zhao H, Shao M, Zhou L, Li X, Wei G, Wu W, Cui J, Chang AH, Sun T, Hu Y, Huang H. Predictive value of next-generation sequencing-based minimal residual disease after CAR-T cell therapy. Bone Marrow Transplant. 2022 Jun 1. doi: 10.1038/s41409-022-01699-2. Epub ahead of print. PMID: 35650329.（点击链接可查看文章内容）
2、Chen H, Gu M, Liang J, Song H, Zhang J, Xu W, Zhao F, Shen D, Shen H, Liao C, Tang Y, Xu X. Minimal residual disease detection by next-generation sequencing of different immunoglobulin gene rearrangements in pediatric B-ALL. Nat Commun. 2023 Nov 17;14(1):7468. doi: 10.1038/s41467-023-43171-9. （点击链接可查看文章内容）
3、Min’er Gu,Yahong Xia, Jingying Zhang, Yongmin Tang, Weiqun Xu, Hua Song Xiaojun Xu. The effectiveness of blinatumomab in clearing measurable residual disease in pediatric B-cell acute lymphoblastic leukemia patients detected by next-generation sequencing. Cancer Med. 2023 Dec;12(24):21978-21984. doi:10.1002/cam4.6771. （点击链接可查看文章内容）
4、Yan N, Wang ZL, Wang XJ, et，al. Measurable residual disease testing by next generation sequencing is more accurate compared with multiparameter flow cytometry in adults with B-cell acute lymphoblastic leukemia. Cancer Lett. 2024 Jul 4;598:217104. doi: 10.1016/j.canlet.2024.217104.
5、CHEN HP, MIAO J, FAN LY, et al. Non-specific clones hamper the reliability of Ig light chain gene rearrangements in next-generation sequencing-based measurable residual disease monitoring in pediatric B-cell ALL: A single-center cohort study[J]. Annals of Laboratory Medicine, 2026.
2023年DelveInsight公司发布的MRD国际市场研究报告中，艾沐蒽/Seq-MRD®是中国唯一一家公司/产品进入国际调研市场报告。DelveInsight是一家领先的医疗保健市场研究和商业咨询公司，以其现成的联合市场研究报告以及为医疗保健行业的公司提供的定制解决方案而闻名。
杭州艾沐蒽生物科技有限公司成立于2016年，是国际前沿的专注于免疫驱动医学技术的国家高新技术企业和专精特新企业。创始人团队来自美国芝加哥大学，在2010年开始使用免疫组基因高通量测序技术开展各种疾病相关研究，于2016年通过自主研发，全国首家推出NGS-MRD血液肿瘤微小残留病（MRD）检测Seq-MRD®，并授权泛生子使用。同时，公司拥有Immun-Traq®肿瘤治疗伴随诊断、Immun-Cheq® 免疫力测评以及ImmuHub®免疫组测序科研服务产品，并布局有基于AI机器学习算法的T-classifier®肿瘤早筛、单细胞测序、新抗原、TCR和抗体发现等平台管线。目前为止发表了50余篇论文，其中包括：The New England Journal of Medicine(IF:158.5), The Lancet(IF:98.4), Nature(IF:65), Signal Transduction and Targeted Therapy(IF:40), Cellular and Molecular Immunology(IF:24), Nature Communications (IF:17)等多篇高分杂志。公司构建几十项发明专利和软件著作权为核心的自主知识产权体系，为医院临床、生命科学研究、新药开发等提供解决方案和产品。艾沐蒽专注于通过解码适应性免疫系统来改变疾病的诊断和治疗，并致力于推进免疫驱动医学领域发展。
