淋巴瘤是起源于淋巴造血系统的恶性肿瘤，以无痛性淋巴结肿大为常见表现，还可能伴随肝脾肿大及发热、盗汗、消瘦等全身症状，可累及全身各组织器官。淋巴瘤亚型众多，大体可分为霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤两大类，不同亚型在诊疗和预后上差异明显。
MRD检测是评估肿瘤治疗效果和判断预后的重要手段，不同的MRD检测方法如影像学、流式细胞术、分子生物学等各有其适用场景。随着二代测序（NGS）技术的广泛兴起，因其高通量、高灵敏度，应用于淋巴瘤MRD检测领域取得了很好的效果。
下面小编详细为大家介绍基于免疫组（IG/TCR）的淋巴瘤NGS MRD检测技术~
淋巴瘤是一种恶性肿瘤，由淋巴细胞异常增殖引起，根据淋巴细胞类型和病变的部位可分为不同亚型。
淋巴瘤大体可分为霍奇金淋巴瘤（HL）（占10%）和非霍奇金淋巴瘤（NHL）（占90%）两大类。非霍奇金淋巴瘤主要包括B细胞淋巴瘤（约占70%）和T/NK细胞淋巴瘤（约占20%）。
B细胞淋巴瘤是指淋巴细胞中的B细胞发生恶性变异，形成肿瘤。B细胞淋巴瘤包括弥漫大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、小淋巴细胞淋巴瘤等不同亚型。
T细胞淋巴瘤是指淋巴细胞中的T细胞发生恶性变异，从而形成肿瘤。可以根据发病部位分为：皮肤T细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤、成人T细胞白血病淋巴瘤等不同亚型。
ctDNA介绍
ctDNA（Circulating Tumor DNA）是指肿瘤细胞释放进入血液循环中的DNA分子。
由于肿瘤细胞在不断分裂生长的过程中，会释放一部分DNA进入血液循环中，这些DNA分子携带了肿瘤细胞的遗传信息，可以被检测到。因此，ctDNA可以作为肿瘤生物标志物进行监测，用于肿瘤的早期筛查、诊断、治疗效果评估和复发监测等方面。
相比于传统的肿瘤检测方法（如组织活检和影像学检查等），ctDNA具有较多创新性的优点:
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非侵入性：不需要切除肿瘤组织或进行穿刺等操作，减少了对患者身体的创伤和疼痛。
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重复性：可以反复进行检测，不受肿瘤部位、大小、深度等因素的影响。
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灵敏度高：可以检测到肿瘤微小变化，比如微小的残留病灶和微转移等。
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特异性强：ctDNA是来自肿瘤细胞的DNA，因此可以避免误诊或漏诊。
基于 ctDNA 的方法在淋巴瘤的诊断和治疗中具有很大的潜力，ctDNA 检测可以作为一种非侵入性的诊断方法，能够对患者是否患有淋巴瘤及癌细胞残留水平进行快速、准确的检测。
目前基于ctDNA的MRD检测方法主要有基因突变位点的检测和Ig/TCR的检测。
基于ctDNA的基因突变检测，虽然临床可根据检测结果进行对应用药的指导，但在MRD检测上也存在一些劣势之处，比如：
[Ⅰ]突变检测结果受到许多因素的影响，如ctDNA浓度、肿瘤细胞的裂解情况等，可能会导致假阳性或假阴性结果。
[Ⅱ]基于ctDNA的突变检测方法无法确定突变来自哪些细胞，可能会掩盖真正的肿瘤细胞，从而导致漏诊。
[Ⅲ]价格较高。
相比之下，基于ctDNA的Ig/TCR MRD检测方法具有以下优势和临床应用功能特点：
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灵敏度高：可以检测到极低浓度的ctDNA，从而检测到微小的残留病灶和微转移等。
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特异性强：基于Ig/TCR重排的MRD检测方法肿瘤克隆序列特异性高，减少了假阳性或假阴性的可能性。
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重复性好：可以反复进行检测，随时监测疾病进展情况。
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可监测治疗效果：基于Ig/TCR重排检测的方法可以及时监测MRD水平，评估治疗效果，帮助医生进行个性化治疗。
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指导分层治疗：根据诱导缓解治疗早期及巩固治疗开始前MRD水平对患者进行危险度分层，指导分层治疗。
基于IG/TCR的NGS MRD检测技术主要适用于淋系血液肿瘤，包括B/T系白血病、多发性骨髓瘤和B/T系淋巴瘤。
淋系血液肿瘤是T/B淋巴细胞发生癌变而导致，当T/B淋巴细胞发生癌变时，会大量复制增殖。而其表面的生物标志物TCR/BCR是不发生改变的，通过高通量测序找到这些出现频率很高的癌细胞受体VDJ基因序列，在治疗后对此基因序列进行追踪，查找其克隆情况，得到MRD值。
这不同于基因突变检测等其它基因测序，基因突变检测是分析DNA构象或解链特性，或者利用DNA变性和复性等特性，进行DNA突变的分析，也就是通过一些基因突变信息来鉴定癌细胞。而NGS MRD是基于测到的可变区序列( 克隆)频率高低来鉴定癌细胞，两者检测原理不同。即便癌细胞DNA发生了突变，TCR/BCR通常是稳定不变的，依然可以进行追踪。
检测类型分为初诊的基线检测和治疗后的追踪检测。
（1）癌细胞克隆性检测
通过患者初诊或癌细胞高负荷时的样本，鉴定出显著性克隆（即癌细胞克隆序列）。
（2）MRD追踪检测
利用筛查出的癌细胞克隆序列，在治疗期间或治疗后评估MRD水平，监测癌细胞含量，同时检测识别新出现的癌细胞序列。
需要注意的是，必须先对初诊样本或者肿瘤高负荷样本进行克隆性检测，找到可用于追踪的癌细胞克隆序列之后，才能在治疗后进行MRD追踪检测。如果基线检测没有找到可追踪的显著性克隆，即为多克隆型，则不适合此技术方法进行MRD追踪。
不同于白血病、多发性骨髓瘤等血液癌症，淋巴瘤既属于T/B细胞癌变所致的血液肿瘤，又同时兼具实体肿瘤的特点——组织癌变，在某些亚型或分期的淋巴瘤患者中，骨髓和外周血中不一定有癌细胞累及。
因此淋巴瘤的初诊克隆性检测建议使用肿瘤组织样本提取gDNA进行检测，MRD追踪检测（治疗后）需要提取外周血ctDNA进行残留检测。若无法提供初诊的肿瘤组织样本，只能提供骨髓/外周血样本的话，需要临床医生确认骨髓/外周血中是有癌细胞累及的。
淋巴瘤的基于IG/TCR的NGS MRD检测送样要求如下：
淋巴瘤的基于IG/TCR的NGS MRD检测，一方面应用于临床中评估治疗效果，预测预后；另一方面还可作为药物临床试验的终点，评价药物疗效。下面分享2篇淋巴瘤NGS MRD应用的高分文章~
发表期刊：Haematologica（IF：7.9）
发表时间：2025年7月
该研究收集了73例新诊断的弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者的肿瘤FFPE样本和外周血样本，检测IGH链和IGK链重排。通过追踪ctDNA样本的IG克隆，评估治疗期间（中期）和治疗结束时（EOT）的MRD状态。
中期时，71.1% ctDNA MRD阴性，28.9%为阳性，ctDNA MRD与PFS显著相关（图1）。EOT时，78.7%为阴性，21.3%为阳性。ctDNA MRD与PFS显著相关，所有阳性患者均复发（图2）。说明基于IG的NGS MRD结果可以预测预后。
图1.治疗中期MRD结果与预后的关系
图2.治疗结束时MRD结果与预后的关系
发表期刊：JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY（IF：42.1）
发表时间：2023年4月
这是一项关于Epcoritamab（一种新型的皮下注射CD3xCD20双特异性T细胞接合抗体）在治疗复发或难治性弥漫大B细胞淋巴瘤（LBCL）中的临床试验研究。在该研究中采用基于IG 的NGS MRD检测作为探索性终点。
研究发现，C3D1时，45.8%的患者为MRD阴性。与MRD阳性患者相比，MRD阴性患者具有更长的PFS。
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Soscia R, Assanto GM, Starza ID, et al. Molecular measurable residual disease by immunoglobulin gene rearrangements on circulating tumor DNA predicts outcome in diffuse large B-cell lymphoma. Haematologica. 2025;110(7):1573-1583.
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Thieblemont C, Phillips T, Ghesquieres H, et al. Epcoritamab, a Novel, Subcutaneous CD3xCD20 Bispecific T-Cell-Engaging Antibody, in Relapsed or Refractory Large B-Cell Lymphoma: Dose Expansion in a Phase I/II Trial. J Clin Oncol. 2023;41(12):2238-2247.
艾沐蒽专注于免疫组二代测序领域多年，是全国首家推出血液肿瘤NGS MRD检测产品Seq-MRD®的公司。Seq-MRD®适用于B/T系白血病、B/T系淋巴瘤、多发性骨髓瘤，能够帮助临床医生预测长期疗效、评估治疗效果、监测缓解状态以及监测早期复发。经过多年的积累和发展，Seq-MRD®在临床检测和科学研究上均取得不少成果，并获得国际市场认可。
获得欧盟CE资质认证
Seq-MRD®获得欧盟CE资质（注册号：DE/CA20/01-IVD-Luxuslebenswelt-190/22），获批的是人淋巴B细胞微小残留病基因检测试剂盒（可逆末端终止测序法）。
获得三项发明专利
艾沐蒽推出的Seq-MRD®血液癌症MRD检测是最早批实现商业化的产品，自2016年研发专利技术至今，艾沐蒽Seq-MRD®已经获得3项国家发明专利：
[1]“一种应用于高通量测序检测T细胞白血病微小残留病的引物组合及试剂盒”（专 利 号: 2016 11204857.0，授权公告号:CN 106957906 B）
[2]“一种检测微小残留病MRD的试剂盒”（专 利 号: 2018 1 1550133.0，授权公告号: CN 109652518 B）
[3]“一种检测微小残留病MRD的方法”（专 利 号: 2018 1 1549203.0，授权公告号: CN 109680062 B）
获得相关软件著作
[1]“免疫组库MRD检测自动化报告系统[简称ImmuReport] V1.0”（登记号：2019SR0916207）
[2]“Seq-MRD检测自动化分析系统（DiscTermite）[简称：DiscTermite]0.4.6“（登记号：2019SR1131517）
[3]“基于免疫组库二代测序的微小残留病（MRD）检测数据处理系统”（登记号：2020SR0507594）
获得荣誉证书
1、艾沐蒽联合浙大附一黄河教授完成的《新型CAR-T细胞研发及其治疗恶性血液病临床转化创新体系建立》获2023年度浙江省科学技术进步奖一等奖。Seq-MRD®在该技术的创新与应用中起到了关键性作用。
2、艾沐蒽申报的“免疫组TCR/Ig高通量测序技术/血液肿瘤微小残留病（MRD）检测/Seq-MRD®”因其创新性、前沿性、市场实用性荣获“2022年度CCTB中国肿瘤标志物产业创新大会创新技术/产品评选”项目二等奖。
2023年获批了【全血/骨髓基因组DNA提取试剂盒】（离心吸附柱法）备案编号：浙杭械备20230798 ，试剂盒分别适用于人外周血、骨髓样本的核酸的提取。
发表相关文献
Seq-MRD®发表相关文献
1、Huang Y, Zhao H, Shao M, Zhou L, Li X, Wei G, Wu W, Cui J, Chang AH, Sun T, Hu Y, Huang H. Predictive value of next-generation sequencing-based minimal residual disease after CAR-T cell therapy. Bone Marrow Transplant. 2022 Jun 1. doi: 10.1038/s41409-022-01699-2. Epub ahead of print. PMID: 35650329.（点击链接可查看文章内容）
2、Chen H, Gu M, Liang J, Song H, Zhang J, Xu W, Zhao F, Shen D, Shen H, Liao C, Tang Y, Xu X. Minimal residual disease detection by next-generation sequencing of different immunoglobulin gene rearrangements in pediatric B-ALL. Nat Commun. 2023 Nov 17;14(1):7468. doi: 10.1038/s41467-023-43171-9. （点击链接可查看文章内容）
3、Min’er Gu,Yahong Xia, Jingying Zhang, Yongmin Tang, Weiqun Xu, Hua Song Xiaojun Xu. The effectiveness of blinatumomab in clearing measurable residual disease in pediatric B-cell acute lymphoblastic leukemia patients detected by next-generation sequencing. Cancer Med. 2023 Dec;12(24):21978-21984. doi:10.1002/cam4.6771. （点击链接可查看文章内容）
4、Yan N, Wang ZL, Wang XJ, et，al. Measurable residual disease testing by next generation sequencing is more accurate compared with multiparameter flow cytometry in adults with B-cell acute lymphoblastic leukemia. Cancer Lett. 2024 Jul 4;598:217104. doi: 10.1016/j.canlet.2024.217104.
获得国际市场认可
2023年DelveInsight公司发布的MRD国际市场研究报告中，艾沐蒽/Seq-MRD®是中国唯一一家公司/产品进入国际调研市场报告。DelveInsight是一家领先的医疗保健市场研究和商业咨询公司，以其现成的联合市场研究报告以及为医疗保健行业的公司提供的定制解决方案而闻名。
杭州艾沐蒽生物科技有限公司成立于2016年，是国际前沿的专注于免疫驱动医学技术的国家高新技术企业。创始人团队来自美国芝加哥大学，在2010年开始使用免疫组基因高通量测序技术开展各种疾病相关研究，于2016年通过自主研发，全国首家推出NGS-MRD血液肿瘤微小残留病（MRD）检测Seq-MRD®，并授权泛生子使用。同时，公司拥有Immun-Traq®肿瘤治疗伴随诊断、Immun-Cheq® 免疫力测评以及ImmuHub®免疫组测序科研服务产品，并布局有基于AI机器学习算法的T-classifier®肿瘤早筛、单细胞测序、TCR-T和抗体发现等平台管线。目前为止发表了数十篇论文，其中包括：The New England Journal of Medicine(IF:158.5), Nature(IF:65), Signal Transduction and Targeted Therapy(IF:40), Cellular and Molecular Immunology(IF:24), Nature Communications (IF:17)等多篇高分杂志。公司构建几十项发明专利和软件著作权为核心的自主知识产权体系，为医院临床、生命科学研究、新药开发等提供解决方案和产品。艾沐蒽专注于通过解码适应性免疫系统来改变疾病的诊断和治疗，并致力于推进免疫驱动医学领域发展。
