MRD导向移植治疗成人Ph阴性急性淋巴细胞白血病：GRAALL‑2014研究
GRAALL-2014研究针对18~59岁成人阴性急性淋巴细胞白血病患者，采用年龄分层化疗联合MRD指导移植的个体化方案，以降低高龄患者治疗毒性、规范移植适应症。研究共纳入743例患者并与历史方案对照，结果显示，45岁以上患者早期死亡率显著下降、缓解率提高，移植需求减少约50%。虽高龄患者复发率略有上升，但无病生存期保持稳定，总生存率明显提升。该研究证实，年龄适配与MRD精准指导的治疗可平衡疗效与安全性，未来联合免疫治疗有望进一步改善预后。
既往儿童化高强度化疗可改善成人阴性急性淋巴细胞白血病疗效，但45岁以上患者毒性大、安全性差，需重新评估移植指征。
·早期研究显示，高龄患者非复发死亡率偏高，与门冬酰胺酶等药物相关，需要年龄适配方案。
·传统移植适应症过宽，仅MRD控制不佳的患者能真正获益。
·GRAALL-2014研究采用年龄分层+MRD指导移植，纳入18–59岁患者，与2005研究对比，探索更安全精准的治疗模式。
GRAALL-2014试验在法、比、瑞三国79家中心开展，纳入 18~59岁初次治疗Ph阴性ALL患者，其中B细胞ALL（B-ALL）489例、T细胞ALL（T-ALL）254例，研究结果与历史GRAALL-2005队列（787例）进行对照。
（1）MRD监测节点及作用：诊断与疗效评估方法采用形态学、免疫表型、细胞遗传学及分子筛查完成诊断；在诱导后、两次巩固后、移植/维持前共4个关键时间点，按欧洲标准检测微小残留病（MRD）；依据第35天骨髓形态与血常规判定完全缓解、复发等疗效。
（2）年龄适配化疗流程：以7天泼尼松预治疗启动，后续行五药诱导；诱导失败给予挽救治疗，毒性不耐受者最多接受2个备用疗程；巩固阶段使用大剂量甲氨蝶呤与阿糖胞苷。
（3）MRD指导移植与分层治疗：以MRD水平作为核心分层指标：诱导后 MRD≥10⁻³或巩固后 MRD≥10⁻⁴的极高危患者，建议在巩固治疗后接受异基因造血干细胞移植；MRD控制较好的低危患者则继续化疗及维持治疗。依据年龄分层设计移植预处理方案与干细胞来源；CNS受累患者增加鞘内注射与放疗；部分高危患者在巩固期联合贝林妥欧单抗或奈拉滨。同时，MRD水平也用于筛选适合免疫靶向治疗的高危人群。
（4）研究终点与统计设计：主要研究终点为4年无病生存期，次要终点包括复发率、非复发死亡率及总生存期。研究采用历史对照设计，以GRAALL-2005研究数据为对照，验证基于MRD的个体化治疗策略的有效性。
1.患者特征：2015年12月—2020年12月，两项针对Ph⁻BALL与TALL的亚研究共纳入768例患者，在排除不符合标准及撤回知情同意的受试者后，最终743例患者纳入分析，其中BALL 489例、TALL 254例。患者中位年龄35岁，45岁及以上占32.2%，整体特征与GRAALL 2005试验相近。两项研究间隔10年，TALL发生率、CNS受累率等指标保持稳定，BALL与TALL基线高白细胞比例无显著差异。相较既往研究，GRAALL 2014相关检测率提升，但关键遗传学异常发生率无明显差异。
2.诱导与挽救治疗应答：在GRAALL 2014研究中，76.2%患者第8天泼尼松应答良好，与既往研究一致。诱导治疗结束后，89.2%患者达到完全缓解（CR），年轻患者缓解率更高。与GRAALL 2005相比，≥45岁患者早期死亡率显著下降至3.3%，挽救期无死亡，因此该人群接受挽救治疗的比例更高。经挽救治疗后超六成患者获CR，整体经1~2疗程治疗后总CR率达93.3%，其中≥45岁患者缓解率显著提升，主要得益于早期死亡减少及挽救治疗应用增加。
3.基于MRD结果的移植分配情况和临床疗效：在693例获得CR的患者中，213例（30.7%）符合MRD定义的极高危标准，被确定为移植候选者。极高危患者构成：延迟CR：30例（14.1%）；TP1-MRD≥10⁻³：140例（65.7%）；TP2-MRD ≥10⁻⁴（无前述标准）：43例（20.2%）。基于MRD分层进行移植的患者完全缓解后总生存期显著改善（HR=0.48；P=0.008）；无病生存期显著改善（HR=0.58；P=0.019）。而在旧版GRAALL-2005采用传统标准时，未观察到移植的明确获益。
4.allo-HSCT适配性：在693例获完全缓解的患者中，30.7%为极高危且符合移植指征，其中14.1%为延迟缓解，多数存在MRD阳性。45岁以下患者极高危比例低于高龄患者，后者不良遗传学异常比例更高。与既往研究相比，移植适配比例明显下降，但实际移植率显著提升，总体移植率达66.7%，各年龄组均高于既往。研究中单倍体供者应用比例上升，移植预处理以TBI方案为主，供者类型选择较前有明显差异。
该研究针对18～59岁Ph染色体阴性成人急性淋巴细胞白血病患者，采用了按年龄调整的GRAALL-2014化疗方案，移植指征仅依据早期微小残留病（MRD）评估。结果显示，基于MRD的筛选策略使接受造血干细胞移植的患者比例减少约一半。
与既往方案相比，研究对45岁及以上患者适当降低化疗强度，显著降低了早期死亡和非复发死亡率，提升了缓解率，且未明显影响无病生存。同时，根据年龄调整门冬酰胺酶、蒽环类药物等剂量，使早期死亡率降至原来的1/3以下，更多耐药患者可安全接受挽救治疗并获得缓解。
在移植方面，MRD应答不佳的患者可从首次缓解期移植中获益，但高危遗传学异常患者若实现良好MRD应答是否仍需移植尚不明确。此外，免疫治疗药物贝林妥欧单抗的应用显著改善了患者预后，未来可能进一步缩小移植适用范围，相关问题也正在后续研究中继续探索。
文献来源：Boissel N, Chevret S, Huguet F, Leguay T, Hunault M, Graux C, Chalandon Y, Delabesse E, Hicheri Y, Chevallier P, Balsat M, Pastoret C, Escoffre-Barbe M, Pasquier F, Joris M, Thiebaut A, Huynh A, Dhédin N, Lemasle E, Bonmati C, Maury S, Guillerm G, Berceanu A, Manz M, Cluzeau T, Turlure P, Rousselot P, de Prijck B, Grardel N, Béné MC, Lafage-Pochitaloff M, Cuccuini W, Ifrah N, Lhéritier V, Asnafi V, Clappier E, Dombret H. Age-adapted chemotherapy and MRD-oriented transplant for Ph-negative acute lymphoblastic leukemia: the GRAALL-2014 trial. Blood. 2026 Feb 19;147(8):821-833. doi: 10.1182/blood.2025029611. PMID: 41135009.
艾沐蒽专注于免疫组二代测序领域多年，是于2016年全国首家推出血液肿瘤NGS MRD检测产品Seq-MRD®的公司。Seq-MRD®适用于B/T系白血病、B/T系淋巴瘤、多发性骨髓瘤，能够帮助临床医生预测长期疗效、评估治疗效果、监测缓解状态以及监测早期复发。经过多年的积累和发展，Seq-MRD®在临床检测和科学研究上均取得不少成果，并获得国际市场认可。
艾沐蒽创始人参与了中华医学会儿科学分会血液学组等权威机构联合发布的《儿童白血病微小残留病监测与临床应用指南（2026）》的撰写，为NGS MRD指导临床治疗的标准化与规范化提供重要指导意见。
Seq-MRD®获得欧盟CE资质（注册号：DE/CA20/01-IVD-Luxuslebenswelt-190/22），获批的是人淋巴B细胞微小残留病基因检测试剂盒（可逆末端终止测序法）。
艾沐蒽推出的Seq-MRD®血液癌症MRD检测是最早批实现商业化的产品，自2016年研发专利技术至今，艾沐蒽Seq-MRD®已经获得3项国家发明专利：
[1]“一种应用于高通量测序检测T细胞白血病微小残留病的引物组合及试剂盒”（专 利 号: 2016 11204857.0，授权公告号:CN 106957906 B）
[2]“一种检测微小残留病MRD的试剂盒”（专 利 号: 2018 1 1550133.0，授权公告号: CN 109652518 B）
[3]“一种检测微小残留病MRD的方法”（专 利 号: 2018 1 1549203.0，授权公告号: CN 109680062 B）
艾沐蒽拥有自主研发的生信分析平台，艾沐蒽Seq-MRD® 已经获得3项国家计算机软件著作：
[1]“免疫组库MRD检测自动化报告系统[简称ImmuReport] V1.0”（登记号：2019SR0916207）
[2]“Seq-MRD检测自动化分析系统（DiscTermite）[简称：DiscTermite]0.4.6“（登记号：2019SR1131517）
[3]“基于免疫组库二代测序的微小残留病（MRD）检测数据处理系统”（登记号：2020SR0507594）
1、艾沐蒽联合浙大附一黄河教授完成的《新型CAR-T细胞研发及其治疗恶性血液病临床转化创新体系建立》获2023年度浙江省科学技术进步奖一等奖。Seq-MRD®在该技术的创新与应用中起到了关键性作用。
2、艾沐蒽申报的“免疫组TCR/Ig高通量测序技术/血液肿瘤微小残留病（MRD）检测/Seq-MRD®”因其创新性、前沿性、市场实用性荣获“2022年度CCTB中国肿瘤标志物产业创新大会创新技术/产品评选”项目二等奖。
2023年获批了【全血/骨髓基因组DNA提取试剂盒】（离心吸附柱法）备案编号：浙杭械备20230798 ，试剂盒分别适用于人外周血、骨髓样本的核酸的提取。
Seq-MRD®发表相关文献
1、Huang Y, Zhao H, Shao M, Zhou L, Li X, Wei G, Wu W, Cui J, Chang AH, Sun T, Hu Y, Huang H. Predictive value of next-generation sequencing-based minimal residual disease after CAR-T cell therapy. Bone Marrow Transplant. 2022 Jun 1. doi: 10.1038/s41409-022-01699-2. Epub ahead of print. PMID: 35650329.（点击链接可查看文章内容）
2、Chen H, Gu M, Liang J, Song H, Zhang J, Xu W, Zhao F, Shen D, Shen H, Liao C, Tang Y, Xu X. Minimal residual disease detection by next-generation sequencing of different immunoglobulin gene rearrangements in pediatric B-ALL. Nat Commun. 2023 Nov 17;14(1):7468. doi: 10.1038/s41467-023-43171-9. （点击链接可查看文章内容）
3、Min’er Gu,Yahong Xia, Jingying Zhang, Yongmin Tang, Weiqun Xu, Hua Song Xiaojun Xu. The effectiveness of blinatumomab in clearing measurable residual disease in pediatric B-cell acute lymphoblastic leukemia patients detected by next-generation sequencing. Cancer Med. 2023 Dec;12(24):21978-21984. doi:10.1002/cam4.6771. （点击链接可查看文章内容）
4、Yan N, Wang ZL, Wang XJ, et，al. Measurable residual disease testing by next generation sequencing is more accurate compared with multiparameter flow cytometry in adults with B-cell acute lymphoblastic leukemia. Cancer Lett. 2024 Jul 4;598:217104. doi: 10.1016/j.canlet.2024.217104.
2023年DelveInsight公司发布的MRD国际市场研究报告中，艾沐蒽/Seq-MRD®是中国唯一一家公司/产品进入国际调研市场报告。DelveInsight是一家领先的医疗保健市场研究和商业咨询公司，以其现成的联合市场研究报告以及为医疗保健行业的公司提供的定制解决方案而闻名。
杭州艾沐蒽生物科技有限公司成立于2016年，是国际前沿的专注于免疫驱动医学技术的国家高新技术企业和专精特新企业。创始人团队来自美国芝加哥大学，在2010年开始使用免疫组基因高通量测序技术开展各种疾病相关研究，于2016年通过自主研发，全国首家推出NGS-MRD血液肿瘤微小残留病（MRD）检测Seq-MRD®，并授权泛生子使用。同时，公司拥有Immun-Traq®肿瘤治疗伴随诊断、Immun-Cheq® 免疫力测评以及ImmuHub®免疫组测序科研服务产品，并布局有基于AI机器学习算法的T-classifier®肿瘤早筛、单细胞测序、新抗原、TCR和抗体发现等平台管线。目前为止发表了50余篇论文，其中包括：The New England Journal of Medicine(IF:158.5), The Lancet(IF:98.4), Nature(IF:65), Signal Transduction and Targeted Therapy(IF:40), Cellular and Molecular Immunology(IF:24), Nature Communications (IF:17)等多篇高分杂志。公司构建几十项发明专利和软件著作权为核心的自主知识产权体系，为医院临床、生命科学研究、新药开发等提供解决方案和产品。艾沐蒽专注于通过解码适应性免疫系统来改变疾病的诊断和治疗，并致力于推进免疫驱动医学领域发展。
